高效液相色谱（HPLC）的基础原理和系统组成

　　高效液相色谱（HPLC）是色谱法的一个重要分支，其应用场景范围广泛，对样品的适用性广，且不受分析对象的挥发性和热稳定性的限制。 几乎所有的化合物，包括高沸点、极性、离子化合物和大分子物质都可以用高效液相色谱法做多元化的分析测定，从而弥补了气相色谱法的缺点。 目前已知的有机物中，约20%可以通过气相色谱法做多元化的分析，而80%一定要通过高效液相色谱法做多元化的分析。 高效液相色谱法具有分离效率高、分析速度快、检验测试灵敏度好等特点，可以分析分离高沸点且不能汽化的热不稳定生理活性物质。 分离与分析技术在该领域的重要应用。

　　色谱法的分离原理是：溶于流动相中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationphase)发生作用(吸附、分配、排阻、亲和)的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。

　　高效液相色谱法以经典的液相色谱为基础，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不一样极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有颗粒极细的高效固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行仔细的检测，以此来实现对试样的分析。

　　HPLC 系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是核心部件。此外，还可根据自身的需求配置梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等，现代HPLC 仪还有微机控制管理系统，进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC 仪还备有自动馏分收集装置。